人白細胞介素elisa試劑盒檢測將純化的人白細胞介素抗體涂于微孔板上，制成固相抗體。將白細胞介素依次加入包被單克隆抗體的微孔中，與HRP標記的白細胞介素抗體結合形成抗體-抗原-酶標記的抗體復合物。在清洗后，將基板TMB添加到顏色中。在使用之前，應在室溫下將工具箱從冷藏環境中取出15-30分鐘。如果打開后酶標板沒有用完，應將酶標板存放在密封袋中。在使用之前，應在室溫下將工具箱從冷藏環境中取出15-30分鐘。如果打開后酶標板沒有用完，應將酶標板存放在密封袋中。
1、待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
2、酶標板置4℃，包被過夜。
3、洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
4、陰性對照孔每孔加入PBS50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
5、酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
6、洗板，同（4）。
7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液100μl。
8、酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
9、洗板，同（4）。
10、每孔加TMB顯色液100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
11、每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應。
12、分別測450nm吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13、數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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